Aneuploidian seulonta Käytetään määrittämään numeeriset kromosomipoikkeavuudet implantointia varten tarkoitetuissa in vitro -alkioissa. Se on sytogeneettinen tutkimus, jossa voidaan määrittää vain tiettyjen kromosomien numeeriset poikkeamat. Aneuploidian seulonta on siten eräs muoto implantaatiota edeltävästä diagnoosista (PGD).
Mikä on aneuploidian seulonta?
Termiä aneuploidy seulonta käytetään tiivistämään sytogeneettiset tutkimusmenetelmät, jotka voivat antaa viitteitä numeerisista aberraatioista tietyissä kromosomeissa in vitro -hedelmöityksessä (IVF). Periaatteessa aneuploidian seulonta voi antaa viitteitä nullosomy, monosomy ja polysomy, kuten B. antaa trisomia.
Nullosomiossa kromosomipari puuttuu kokonaan, monosomiosta puuttuu yksi kromosomiparin homologinen kromosomi ja polysomiossa on enemmän kuin kaksi homologista kromosomia tietylle kromosomiparille. Tunnetuin polysomia on trisomia 21, mikä johtaa Downin oireyhtymään. Koska suurin osa numeerisista kromosomipoikkeavuuksista - erityisesti monosomioista - ovat tappavia, ts. Johtavat luonnollisiin abortteihin, keskenmenoihin tai kuolleiden syntymään, kohtuun istutetaan vain alkioita, joissa ei ole havaittavissa kromosomaalisia poikkeavuuksia.
Tämän pitäisi parantaa IVF: n onnistumisastetta, mutta tietyt kromosomipoikkeavuudet eivät välttämättä ole tappavia, vaan johtavat epänormaalisuuksiin ja vakaviin rajoituksiin myöhemmässä elämässä, kuten Downin tai Turnerin oireyhtymässä. Tästä syystä joissakin maissa on eettisistä syistä yleinen kielto tai ankarat rajoitukset tämän tyyppiselle implantaatiota edeltävälle diagnoosille (PGD).
Toiminta, vaikutus ja tavoitteet
Aneuploidian seulontaa käytetään vain in vitro -hedelmöitykseen. Tärkein tavoite on siirtää alkioita vain kohdissa, joissa ei ole havaittavissa kromosomipoikkeavuuksia, jotta saadaan mahdollisimman suuri mahdollisuus menestyä raskauden aikana keinosiemennyksellä. Periaatteessa voidaan erottaa kaksi polaarisen kehon diagnoosimenetelmää ja ennen implantaatiota koskevan alkion tutkiminen. Ensimmäisessä menetelmässä tutkitaan munasolun napakappaleita, joita ei ole vielä hedelmöitetty.
Tässä tarkistetaan vain munasolun mahdollinen aneuploidia. Tämä tehdään olettaen, että noin 90% aneuploidioista on peräisin äidistä. Se ei ole PGD suppeassa merkityksessä, vaan hedelmöitysdiagnostiikka, koska mitään hedelmöitystä, ts. Munan fuusioitumista spermasoluun ei ole tapahtunut. Toisaalta implantointia edeltävän alkion anneuploidinen seulonta varhaisessa blastula-vaiheessa katsotaan PGD: ksi, koska tutkimus liittyy ”oikeaan” alkion vaiheeseen - vaikka se olisi hyvin varhainen vaihe, vain muutaman päivän ikäinen.
Polaarisen kehon diagnostiikassa kaksi polaarista elintä, jotka munasolu muodostaa ensimmäisen ja toisen meioosin aikana, ennen kuin se sulautuu spermasoluun, poistetaan ja tutkitaan aneuploidian varalta. Niin kutsuttua FISH-testiä (fluoresenssi in situ -hybridisaatio) käytetään mahdollisen esiintyvän aneuploidian määrittämiseen. Toistaiseksi FISH-testi on mahdollistanut vain kromosomien 13, 16, 18, 21, 22 sekä sukupuolikromosomien X ja Y tutkimisen. Kaksoissierukan rakenteen kromosomit jakautuvat meioosin jälkeen yhteyteen kromosomispesifisiin DNA-koettimiin, joilla on vastaava komplementaarinen DNA-sekvenssi.
DNA-koettimet on merkitty erilaisilla fluoresoivilla väreillä. Homologiset kromosomit voidaan laskea valomikroskoopilla puoliautomaattisessa prosessissa, jotta numeeriset poikkeamat voidaan tunnistaa. Vastaavasti polaarisen kehon diagnoosin kanssa aneuploidiaseulonta suoritetaan implantaatiota edeltäville alkioille, jotka ovat vielä varhaisessa blastomeerivaiheessa. Nyt käsittelemme kuitenkin kromosomien diploidisia sarjoja, joiden kaksoiskierre on ensin jaoteltava, jotta kromosomit voivat muodostaa yhteyden komplementaarisiin DNA-koettimiin.
Aneuploidian seulonnan tavoitteena on molemmissa menetelmissä positiivinen valinta in vitro hedelmöitetyistä munasoluista ennen kohdunsiirtoa, jotta saavutetaan suurin mahdollinen onnistumisaste halutulle raskaudelle. Paljon keskusteltu eettinen ongelma syntyy negatiivisesta valinnasta, joka kytkeytyy automaattisesti positiiviseen valintaan ja jonka jotkut äärimmäiset kriitikot haluavat käyttää perusteluilla lähentääkseen sitä eutanasiaa. Toinen eettinen ongelma nähdään IVF: n käytöllä niin kutsutun pelastusvauvan tuottamiseksi. In vitro tuotettujen alkioiden positiivista valintaa voidaan käyttää viljelyyn kaikkivoipaisilla, immunokompatibilisilla kantasoluilla, jotka implantoinnin avulla voisivat pelastaa sisaruksia, joilla on tiettyjä sairauksia.
Riskit, sivuvaikutukset ja vaarat
Itse aneuploidinen seulonta sekä tutkittavien soluydinten uuttaminen tapahtuvat kehon ulkopuolella, joten siihen ei liity mitään välittömiä terveysriskejä tai -vaaroja, joten siinä ei ole sivuvaikutuksia. Varsinaiset riskit ja vaarat ovat tosiasiassa, että blastomeereissä, ts. Implantointia edeltävissä alkioissa, tehdyn anoiploidian seulonnan hyötyä menestysasteen lisäämiselle halutun raskauden suhteen ei ole vielä saavutettu.
Yleensä systeemiset ongelmat johtuvat seulonnan tarkkuuden liioiteltuista odotuksista. Tämä pätee sekä positiiviseen että negatiiviseen tulokseen. Positiivinen tulos, ts. Ainakin yksi kromosomaalinen poikkeama havaittiin, liittyy tiettyyn epävarmuuteen. Voi tapahtua, että positiivinen tulos sulkee väärin vastaavan munasolun siirron, vaikka todellisuudessa ei ole kromosomivirhettä. Tämän tyyppinen väärä diagnoosi johtuu vähemmän itse toimenpiteestä kuin siitä, että blastula-vaiheessa olevissa alkioissa voi olla muutama solu, joilla on kromosomipoikkeavuuksia.
Toisaalta IVF-lapsen mahdollisten vanhempien ei tarvitse olla varma, että jos aneuploidiatesti on negatiivinen, kromosomaalista poikkeavuutta ei todellakaan ole. Toinen vaara syntyy, kun tarvittava määrä soluja poistetaan alkiosta. Tapahtuu, että biopsian avulla otetut solut kuolevat eikä niitä voida enää tutkia. Koska biopsiaa ei voida enää toistaa samalle alkialle, sitä ei voida enää käyttää elinsiirtoon, koska testitulosta ei ole. Keskustellaan myös siitä, missä määrin biopsia vaikuttaa alkion hedelmällisyyteen, niin että raskauden yleinen onnistumisaste vaikuttaa.
.jpg)
.jpg)
